赤藓红

化学名称：9-(o-羧基苯基)-6-羟基-2, 4,5, 7-四碘-3H-呫吨-3-酮二钠盐一水合物

由荧光素碘化而得。将间苯二酚；苯酐和无水氯化锌加热熔融，得到粗制荧光素。粗品荧光素用乙醇精制后，溶解在氢氧化钠溶液中，再加碘进行反应。加入盐酸，析出结晶，然后将其转变成钠盐，浓缩即得。

该品可单独使用或与其他食用色素配合，用于糕点；农产水产加工品（樱桃；鱼糕；针锦八宝酱菜）等多种食品。中国食品添加剂使用卫生标准（GB2760-86）规定，赤鲜红在食品中最大使用量为0.05g/kg。此外，该品还用作药物和化妆品的色素。大鼠口服LD50为1900mg/kg，联合国粮农组织和世界卫生组织规定，人的一日允许摄取量（ADI）为0-1.25mg/kg。

 

外观：本品为红至红褐色粉末或颗粒

理化指标：

仪器试剂

乙酸；盐酸；乙酸铵溶液：1.5g/L；分光光度计；比色皿：10mm。

试验方法：

称取0.1g试样，溶于100mL水中，呈带蓝光的红色澄清溶液，取5mL溶液加入1mL盐酸，则产生红色沉淀。

称取0.1g试样溶于硫酸溶液显褐黄色，取此液2～3滴加水5mL，产生橙红色沉淀。

称取试样约0.1g（精确至0.01g），溶于100mL乙酸铵溶液中，取此溶液1mL，加乙酸铵溶液配至100mL，该溶液的最大吸收波长为526nm±2nm。

赤藓红含量的测定方法有重量法、分光光度比色法、高效液相色谱法、示波极谱法、表面增强拉曼光谱。

重量法（仲裁法）

1、方法提要

试样溶解后，经稀释、酸化、煮沸，并经过恒重过滤，再恒重，然后进行称量计算。

2、仪器试剂

盐酸溶液：1+49；1+199；仪器、设备：G4玻璃砂坩埚形过滤器。

3、测定方法

称取约2.5g 试样（精确至0.0001g），置于烧杯中，用水溶解后移入250mL 容量瓶中，稀释至刻度，摇匀。吸取50mL 该溶液，置于250 mL 烧杯中，加热至沸腾后，加入20 mL 盐酸溶液(1+49)，再次煮沸，然后用5 mL 水冲洗烧杯内壁，盖上表面皿，在沸水浴上加热约5h 后，放冷至室温，用已在135℃±2℃烘至恒量，并冷却称量过的G4 玻璃砂芯坩埚，将沉淀物过滤。再每次用15mL 盐酸溶液(1+199)冲洗，洗涤二次后，再用15mL 水洗一次，将沉淀物和G4 玻璃砂芯坩埚在135℃±2℃恒温干燥箱中烘至恒量，在干燥器内冷却30min 后称量。

分光光度比色法

1、方法提要

将试样与已知含量的标样分别用水溶解后，在最大吸收波长处，分别测其吸光度，然后计算出试样的含量。

2、仪器试剂

乙酸铵溶液；赤藓红标准样品（含量≥85.0%）；分光光度计；比色皿：10mm。

3、测试方法

赤藓红标样溶液的配制：称取约0.25g（精确至0.0001g）赤藓红标准样品，溶于适量水中，移入1000mL 棕色容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。准确吸取10 mL，移入500 mL 棕色容量瓶中，加乙酸铵溶液稀释至刻度，摇匀。

赤藓红试样溶液的配制：称量与操作方法同标样溶液的配制。

将赤藓红标样溶液和赤藓红试样溶液分别置于10mm 比色皿中，同在最大吸收波长处用分光光度计测定各自的吸光度值，用乙酸铵溶液作参比液。 

高效液相色谱法

1、方法提要

食品中的合成着色剂经聚酰胺吸附法或液一液分配法提取后，制成水溶液，注入高效液相色谱仪，经反相色谱分离，根据保留时间定性和与峰面积比较进行定量。
利用高效液相色谱法测定食品中合成着色剂的最小检出量为18ng，当进样量为0.025g样品时，最低检出浓度为0.20.72mg/kg。

2、测定方法

将制备好的样品溶液放入分液漏斗中，加2mL盐酸、三正辛胺正丁醇溶液(5%)10～20mL，充分振摇提取，静置分取有机相，重复提取2～3次，每次10mL，直至有机相无色，合并有机相，用饱和硫酸钠溶液洗2次，每次10mL，分取有机相，放于蒸发皿中，水浴加热浓缩至l0mL，转移至分液漏斗中，加60mL正己烷，混匀，加氨水提取2～3次，每次5mL，合并氨水溶液层(含水溶性酸性色素)，用正己烷洗 2～3次，分取氨水层加乙酸调成中性，水浴加热蒸发至近干，加水定容至5mL。经滤膜(0.45μm)过滤，取10μL进高效液相色谱仪。

高效液相色谱分析参考条件

①色谱柱：YWG-Cl8，10μm不锈钢柱，4.6mm×250mm。
②流动相：甲醇一乙酸铵溶液(0.02 mol/L)(pH4)。
③梯度洗脱：用浓度为20%～35%的甲醇洗脱5min；用浓度为35%～98%的甲醇5min；用浓度为98%的甲醇继续洗脱6min。
④流速：1mL/min。
⑤紫外检测器，波长254nm。

取相同体积样液和合成着色剂标准使用液分别注入高效液相色谱仪，根据保留时间定性，外标峰面积法定量。

示波极谱法

1、仪器试剂

JP一303型示波极谱仪成都仪器厂；三电极系统滴汞电极、饱和甘汞电报、铂电极；底液0．25 tool/L乙酸钠一1 40 mol/L己酸(pH3．6)缓冲液；盐酸、三正辛胺、正丁醇、正己烷、己酸；饱和硫酸钠溶液；氨水(2+98)；赤藓红标准溶液(1 n~ nlL)。

2、测定方法

极谱条件：取适量上述样品提取液0．10 1．00mL于10 mL具塞比色管中，加入底液至10 0mL，混匀，倒入电解池中测定。三电极系统，阴极二阶导数扫描．超始电位一350 mv，于一570]TIr~r记录极谱导数波高。

标准曲线制备：取赤藓红标准0．00，0．50，1．0o，2 50，5．0o，10．0，20．0，50 0 ug于10 mL比色管中，进行测定。 

表面增强拉曼光谱法

方法提要

理论计算拉曼采用密度泛函理论(DFT)在B3LYP/6-31G(d)水平上对赤藓红分子进行了构型优化,赤藓红的实验拉曼光谱与理论计算拉曼对比具有很好的对应性。采用金纳米颗粒作为表面增强拉曼基底,从赤藓红与金胶混合体积比、溶液pH和混合时间对检测条件进行优化,混合体积比为1:1、pH为5、混合时间为10min时赤藓红溶液的检测限可达到1μg/mL。研究结果证明以金胶为增强基底的表面增强拉曼光谱法可以快速准确地鉴定赤藓红,为日后检测常规食品样品中的赤藓红提供了基础。

赤藓红在食品中的使用限量。 

赤藓红作为一种人工合成色素，色泽鲜艳，本低廉，常用于食品加工制品和饮料中，以提高其感官性。大量厂家为了改变产品外观，吸引消费者购买，滥用人工合成色素。美、英等国的科研人员在进行相关的研究后发现，人工合成色素非但不能向人体提供营养物质，而且会导致生育力下降、畸胎等等，甚至可能转换成致癌物质。此外，许多食用合成色素在生产过程中还可能混入砷和铅。过去用于人造奶油着色的奶油黄，早已被证实可以导致人和动物患上肝癌，而其它种类的合成色素如橙黄能导致皮下肉瘤、肝癌、肠癌和恶性淋巴癌等。大多数色素只是改善食品的外观，不能被人体吸收，而是通过肝脏或肾脏代谢后排出体外，无形中增加了肝肾负担。但是一些个体商贩和个别生产厂家，只顾片面追求利润，在食品和饮料中随意使用人工合成色素，把食品打扮得色彩斑斓，长期食入不符规定着色剂的食品后，就会对人体健康产生不良的影响。正处于生长发育期的儿童，对有毒物质的代谢能力本来就比成年人低，加上体内器官功能比较脆弱，神经系统发育尚不健全，对化学物质尤为敏感，若过多过久地食用色素浓的食品，会影响神经系统，容易引起好动、情绪不稳定、注意力不集中、自制力差、行为怪癖、食欲减退等不良症状。